利用CRISPR-Cas9技术制备基因打靶细胞系

我们利用CRISPR-Cas9技术(包括Cas(D10A)突变体的双切口CRISPR-Cas9技术)能够获得完全基因敲除细胞系或基因敲入细胞系。与传统的SiRNA或Sh-RNA “基因敲低”技术相比,CRISPR-Cas9技术在基因组水平实现对基因的敲除,因此获得的表型将会更加显著。值得注意的是,如果想要敲除的目的基因对于细胞的存活或增殖所必需,则极有可能难以获得完全基因敲除的细胞,但是依然可以获得只有一个同源基因敲除的“杂合子”细胞系。



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